Z6·尊龙凯时

RAS“on”分子胶RMC-6236早期临床数据披露，RMC-6236单药作为胰腺癌患者的二线疗法，在KRAS G12X亚型患者和RAS任意突变患者的中位PFS（progression-free survival，无进展生存期）分别长达8.1个月和7.6个月，而过往数据中，这类患者的中位PFS仅为2.0-3.5个月[1]，且RMC-6236具有可控的安全性以及在KRAS G12X突变肿瘤患者中有很好的耐受性[2]。这积极的结果对胰腺癌的治疗具有重大突破。此外，该公司也将计划开展3期临床。

RAS是第一个被发现的人类肿瘤基因，该家族包含KRAS、HRAS和NRAS。RAS癌基因是癌症中突变频率最高的基因之一，其经常的驱动突变发生在密码子12，13和61[3]。而KRAS是RAS家族中最常见的亚型，在实体瘤中KRAS也是出现突变频率最高的。癌症相关的KRAS突变常见于非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancer, NSCLC）、结直肠癌（Colorectal cancer, CRC）以及胰腺导管腺癌（pancreatic ductal adenocarcinoma, PDAC）（图1）。

图1 肿瘤中的RAS突变频率[2]

目前已经有两款上市的抑制剂，分别是sotorasib (AMG510)和adagrasib (MRTX849)，两款抑制剂都是靶向KRAS G12C的非活性状态。两款抑制剂的上市也打破了KRAS不可成药的观点。然而，由于当前的药物只针对于KRAS G12C或其他单一突变体，在仅使用该抑制剂时并不能对其他突变体有很好的抑制，这也导致了耐药性的产生。因此，能够广泛抑制KRAS突变体的研究仍在继续开展[4]。

最近，Revolution Medicines研发出了一种新的可逆三复合物RAS广谱抑制剂RMC-7977。临床前研究中已经显示RMC-7977对携带各种RAS基因型的RAS成瘾肿瘤的有效活性[5]（图3）。

图3 RMC-7977三元复合物模型[5]

与RMC-7977同为Pan-RAS抑制剂的RMC-6236，是一种 RAS（ON）多选择性非共价抑制剂。该抑制剂可抑制野生型变体和典型RAS亚型突变体GTP结合的活性状态。在临床前实验也证明RMC-6236对RAS突变体和野生型具有广谱抑制作用，并推动了多种肿瘤类型的消退[6]。

该公司也开发了另一种分子胶共价抑制剂RMC-6291，相较于RMC-7977和RMC-6236的广泛抑制作用，该抑制剂主要针对于KRAS-G12C突变体。目前最高临床状态正处于临床1/2期。

图4 三种抑制剂的化学结构

与其他抑制剂不同的是，分子胶可以与KRAS结合。这是因为，这些抑制剂来源于一种天然产物sanglifehrin A，这种天然产物能与高亲和力的亲环蛋白A（cyclophilin A，CypA）结合。这些抑制剂具有独立的RAS和CypA结合基序，结合CypA后，三复合物抑制剂重塑CypA表面，从而产生了对KRAS具有高亲和力的二元复合物。由此产生的CypA-化合物-KRAS三复合物在空间阻断了KRAS-效应器之间的相互作用并破坏了下游信号的传导[7]。目前，针对RAS突变相关的癌症药物较少，具有很大的临床缺口。因此，开发RAS (ON)多选择抑制剂具有广阔的市场前景。

图5 分子胶抑制原理示意图[2]

Z6·尊龙凯时RAS-RAF disruption筛选平台介绍

Z6·尊龙凯时目前已经纯化出CypA、KRAS、HRAS、NRAS野生型以及KRAS突变体等蛋白，蛋白团队拥有多年丰富的工作经验，每批蛋白都会经过活性验证，以保证纯度和活性，充分满足各种实验需求。

2. KRAS (ON)/CypA Ternary assay

HTRF方法检测原理图

我们检测了广泛抑制剂RMC-6236、RMC-7977以及KRAS-G12C共价抑制剂RMC-6291，并且是在GTP以及GTP类似物GMP-PNP结合突变体两种状态下形成三元复合物的能力。

KRAS (ON)/CypA Ternary assay筛选

3.RAS(ON)/CypA/cRAF binding assay

文献报道RAS-分子胶-CypA三元复合物能够空间阻断RAS与RAS效应因子的结合。利用该机制，我们开发了HTRF方法。即当分子胶发挥作用时便不能检测到RAS（ON）与RAF之间的结合信号。

HTRF方法检测原理图

我们检测了三种抑制剂的RMC-6236、RMC-7977和RMC-6291抑制RAS (ON)与CRAF的结合能力，由数据可以看出RMC-6291对KRAS-G12C具有选择抑制的作用。此外，我们还检测了GTP和GMP-PNP结合KRAS突变体条件下的抑制作用，为客户提供多种选择需求。

RAS(ON)/CypA/cRAF binding assay筛选

4.SPR方法检测分子胶与CypA的结合

RMC-6236与CypA 结合SPR评价

小结

Z6·尊龙凯时团队不仅可以提供RAS (ON)::CypA三元复合物和RAS (ON)::CypA::RBD抑制的生物评价体系，同时可提供上述涉及到的蛋白产品以及自主完成该反应的试剂盒，满足客户的多种需求。此外，Z6·尊龙凯时团队具有丰富的细胞、DMPK等研究经验，致力于在生化、ADME、PK/PD、体内药理学等生物学领域为客户提供一体化的服务。

参考文献

[1]http://ir.revmed.com/static-files/eeeb0690-0ef4-44b8-b5fe-8d11d8df3c9a.

[2]Alexander I Spira, Alexander N Starodub, et al. Abstract PR010: Preliminary safety and pharmacokinetic profiles of RMC-6236, a first-in-class, RAS-selective, tri-complex RASMULTI(ON) inhibitor in patients with KRAS mutant solid tumors on the Phase 1 trial RMC-6236-001. Mol Cancer Ther 1 December 2023; 22 (12_Supplement): PR010. http://doi.org/10.1158/1535-7163.TARG-23-PR010.

[3]Simanshu DK, Nissley DV, McCormick F. RAS proteins and their regulators in human disease. Cell. 2017;170:17–33. doi: 10.1016/j.cell.2017.06.009.

[4]http://www.revmed.com/wp-content/uploads/2023/10/RMC-6236-a-Novel-First-in-Class-Tri-complex-RASMULTION-Inhibitor.pdf

[5]Kim, Dongsung et al. “Pan-KRAS inhibitor disables oncogenic signalling and tumour growth.” Nature vol. 619,7968 (2023): 160-166. doi:10.1038/s41586-023-06123-3.

[6]Holderfield M, Lee BJ, Jiang J, et al. Concurrent inhibition of oncogenic and wild-type RAS-GTP for cancer therapy. Nature. 2024;629(8013):919-926. doi:10.1038/s41586-024-07205-6.

[7]Jiang J, Jiang L, Maldonato BJ, et al. Translational and Therapeutic Evaluation of RAS-GTP Inhibition by RMC-6236 in RAS-Driven Cancers. Cancer Discov. 2024;14(6):994-1017. doi:10.1158/2159-8290.CD-24-0027